Identificação de micobactérias em amostras de triatomíneos pela metologia PCR-hsp65

Abstract

INTRODUÇÃO: A importância de um método rápido e sensível para o diagnóstico laboratorial das micobactérias levou ao desenvolvimento das técnicas moleculares. Nas últimas décadas, diferentes ferramentas revolucionaram o processo de amplificação e identificação dos microrganismos, como as do gênero Mycobacterium. Apesar da investigação de micobactérias ser dificultada pelo o lento crescimento delas, há pesquisas que abordam sobre sua identificação em amostras ambientais. No Ceará, o município de Sobral, contém um elevado índice de doenças causadas por micobactérias, onde foram encontrados dentro do perímetro urbano vetores triatomíneos contendo na sua microbiota o gênero Mycobacterium como um dos grupos dominantes. OBJETIVO: Identificar micobactérias, por PCR-hps65, presentes em triatomíneos e ressaltar a importância de uma técnica rápida para o processo de identificação. METODOLOGIA: Os insetos utilizados neste estudo foram fornecidos pelo Centro de Controle de Zoonoses de Sobral. Foi realizada a extração do DNA genômico dos triatomíneos e amplificação da região hsp65 do DNA de Mycobacterium sp., seguido de identificação das MNT ambientais por padrão de digestão com enzimas de endorrestrição (RFLP). RESULTADOS: 167 amostras de triatomíneos foram submetidas às reações de PCR para a identificação da região hsp65 do DNA de Mycobacterium sp. Das amostras analisadas, 43,11% (72/167) apresentaram amplificação positiva ao gênero Mycobacterium pela análise por PRA-hsp65. As espécies predominantemente encontradas nas amostras após a digestão enzimática foram aquelas pertencentes ao Complexo Mycobacterium tuberculosis (40,84%); M. senegalense e M. smegmatis. CONCLUSÃO: O estudo demostrou o quanto é importante métodos de detecção rápido, como o PCR-hsp65 para a identificação da maioria das micobactérias em laboratórios clínicos podendo contribuir para um diagnóstico precoce e assim auxiliar no controle das doenças, bem como na otimização do tempo necessário para a identificação.